中樞神經(jīng)系統(tǒng)靶向性Mn-SOD的克隆和在大腸桿菌中的表達(dá)研究

靶向性超氧化物歧化酶(SOD)是治療氧自由基引起神經(jīng)細(xì)胞損傷所致疾病等的有效途徑.將破傷風(fēng)毒素C部分(tetanus toxin fragment C,TTC)基因與編碼Mn-SOD的cDNA融合克隆進(jìn)pET-22b(+)載體,1 mmol/L異丙基-D-硫代半乳糖(IPTG)誘導(dǎo)在大腸桿菌中表達(dá).SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)圖譜可見約71 ku有表達(dá)產(chǎn)物條帶,與理論計(jì)算值相符;蛋白質(zhì)印跡(Western blot)分析顯示,表達(dá)產(chǎn)物與抗Mn-SOD及破傷風(fēng)毒素的多抗有免疫反應(yīng),而且表達(dá)產(chǎn)物用鄰苯三酚自氧化法測定具有SOD活性.融合蛋白可作為有效的試劑靶向性輸送Mn-SOD到神經(jīng)元細(xì)胞,這為進(jìn)一步研究靶向性SOD的治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)的相關(guān)疾病提供了基礎(chǔ).

作 者： 張艷紅 賀華君 袁勤生 楊衛(wèi)東 吳祥甫   作者單位： 張艷紅,賀華君,袁勤生(華東理工大學(xué)生物化學(xué)研究所,生物反應(yīng)器工程國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,上海,200237)

楊衛(wèi)東,吳祥甫(中國科學(xué)院上海生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所,上海,200031) 

刊 名： 生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展  ISTIC SCI PKU 英文刊名： PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS  年，卷(期)： 2001 28(6)  分類號(hào)： Q786  關(guān)鍵詞： 錳超氧化物歧化酶   破傷風(fēng)毒C部分   融合表達(dá)   中樞神經(jīng)系統(tǒng)   靶向性運(yùn)輸  

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