外周血內皮祖細胞體外培養(yǎng)分化研究

目的從人外周血中分離、培養(yǎng)和鑒定內皮祖細胞(EPCs),并觀察其在體外增殖分化過程中各種細胞表型的變化.方法采用密度梯度離心方法獲得外周血單個核細胞,體外進行誘導、分化和擴增,于培養(yǎng)第7天選擇免疫熒光(DiI-acLDL/ FITC-UEA-Ⅰ)鑒定EPCs,并且用流式細胞儀和RT-PCR方法觀察上述細胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表達變化.結果外周血單個核細胞在培養(yǎng)過程中出現梭形貼壁和鋪路石樣等形態(tài);第7天免疫熒光染色表明,約70%的細胞呈雙熒光陽性;流式細胞儀分析顯示,CD31和KDR表達在體外培養(yǎng)過程中逐漸升高,至第21天分別達到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天達到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降為(28.3%±12.2)%;RT-PCR結果表明,第4、10和21天eNOS的表達逐漸增強.結論本試驗成功從外周血單個核細胞中分離培養(yǎng)出EPCs,在其體外擴增分化為成熟內皮細胞的過程中,CD31、KDR和eNOS等內皮細胞標志表達逐漸增強,而CD34的表達在內皮祖細胞的成熟分化過程中略有下降.

作 者： 顧俊 王長謙 范華驊 聶曉絢 何奔 王彬堯 黃定九 GU Jun WANG Chang-qian FAN Hua-hua Nie Xiao-xuan HE Ben WANG Bin-yao Huang Ding-jiu   作者單位： 顧俊,王長謙,何奔,王彬堯,黃定九,GU Jun,WANG Chang-qian,HE Ben,WANG Bin-yao,Huang Ding-jiu(上海交通大學醫(yī)學院仁濟醫(yī)院心內科,上海,200001)

范華驊,聶曉絢,FAN Hua-hua,Nie Xiao-xuan(上海血液中心血液工程研究室) 

刊 名： 上海交通大學學報（醫(yī)學版）  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號： Q813.1 Q254  關鍵詞： 內皮祖細胞   內皮細胞   血管新生  

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